1.保證透射電鏡各部分的對中。
所謂對中的標準就是要做到:(一)當放大倍數改變時,視場的中心不會丟失;(
二)當改變物樣上的照明條件時,照明束不會失去均勻性或偏離中心;(三)對圖像進
行調焦時,它不致偏離中J心;(四)當功能開關從一種模式轉換到另一種模式時,生
物顯微鏡和體視顯微鏡的使用物樣上的照明情況不受影響。要保證以上各點,首先
電鏡本身的設計制造當然應該是精良的。
電鏡的對中包括:*,電子槍、聚光鏡以及中間鏡、投影鏡等相對于物鏡的
對中。因為一臺電鏡出廠時已保證物鏡光軸與電鏡的機械軸*重合,所以可把物
鏡作為對中時的參考標準。第二,電鏡各級配備的電子束偏轉系統要對中合軸。第
三,各級可動光闌(包括聚光鏡、物鏡、中間鏡的光闌)也要對中。誠然,生物顯微
鏡和體視顯微鏡的使用一般情況下各實驗室都有專門技術人員負責對電鏡的基本調
整,以提供必要的工作條件.但是在使用過程中,有些對中情況不可避免地會遭到
破壞或改變,因此研究人員必須能及時發(fā)現問題,
2.特別重視各級透鏡尤其是物鏡的消像散.
用低放大倍數檢查射到熒光屏的光斑時,如發(fā)現光斑偏離圓形。這說明存在聚
光鏡的像散.在高放大倍數時它會導致zui大亮度的損失,并形成不對稱的照明孔徑
角而影響成像質量因此在調對中的同時,應該對聚光鏡消像散.
用低放大倍數檢查射到熒光屏的光斑時,如發(fā)現光斑偏離圓形。這說明存在聚
光鏡的像散.在高放大倍數時它會導致zui大亮度的損失,生物和體視顯微鏡
的使用并形成不對稱的照明孔徑角而影響成像質童。因此在調對中的同時,應該對
聚光鏡消像散.
物鏡的消像散更為重要。由于像散的存在,不僅不能得到清晰的圖
像,而且在高放大倍數的圖像中往往會出現一些細節(jié)假象。消像散的有效方法是在
樣品支持膜上找到一個小孔,先將物鏡調于小量過焦狀態(tài),生物顯微鏡和體視顯微
鏡的使用再調節(jié)消像散器使膜孔周圍出現的黑邊達到處處寬度均勻。zui后再將物鏡
調回至正聚焦.從事高分辨工作的科技工作者必須自己學會消像散。
3。學會正確選擇各項工作參盈和工作模式.
電鏡中有許多參t是可供選擇的,例如電子槍的加速電壓、聚光鏡
決定的基本束斑尺度、各級透鏡的可動光闌孔徑等.電鏡工作者可根據實驗樣品的
厚度、使用化學組成、原始襯度特性以及耐幅照程度等自由選用上述各物理量。
電鏡本身還可用于不同工作模式,如常規(guī)成像、低倍查樣、選區(qū)成像、選區(qū)衍
射及高分辨衍射等。如果加上X射線能譜儀、使用電子能量損失譜儀、掃描顯示單元等附件,則它的工作模式將更多。
4.認真對待圖像記錄工作,力求能有高質量的圖片到手。
可以說電鏡工作的成果幾乎全部體現在所獲得的圖片上.因此在保證價
格*工作條件的前提下,電鏡工作者要十分重視圖像的拍攝,包括調焦、選擇放
大倍數、調節(jié)襯度和曝光量等,還要防止照相過程中可能遇到的機械振動和樣品漂
移等。